Selección de un medio de cultivo para la obtención de vesículas de membrana externa de Salmonella spp.

Resumen

La salmonelosis es una enfermedad infecciosa causada por bacterias Gram negativas del género Salmonella. En la actualidad existen vacunas licenciadas para uso en humanos contra Salmonella Typhi. Reportes en la literatura sobre proteínas de membrana externa de Salmonella spp. con actividad inmunogénica y la existencia de vacunas licenciadas basadas en el uso de vesículas de membrana externa de otras bacterias Gram negativas como Neisseria meningitidis serogrupo B, apoyan la factibilidad del desarrollo de vacunas basadas en vesículas contra Salmonella. Con la finalidad de seleccionar un medio de cultivo para la obtención de vesículas de membrana externa de Salmonella spp., se evaluó el comportamiento de la cepa ATCC-14028 de Salmonella Typhimurium en cinco medios de cultivo, de los que se seleccionaron dos atendiendo al rendimiento en biomasa obtenido y velocidad específica de crecimiento. A partir del cultivo de la bacteria en los medios seleccionados, se obtuvieron y purificaron vesículas de membrana externa empleando el método de extracción con detergentes. Fueron caracterizadas mediante una batería analítica: método de Lowry, electroforesis en gel de poliacrilamida (12,5 %) con estudio densitométrico, método de dispersión dinámica de la luz y el potencial Z. Los resultados obtenidos permitieron seleccionar el medio empleado por el Instituto de Veterinaria de Irán para el cultivo de enterobacterias (IVI) para la obtención de vesículas de membrana externa de Salmonella spp., por ser el medio donde se obtuvo mayor rendimiento en biomasa (11,4 g/L) y expresión proteica (21 bandas proteicas en electroforesis en gel de poliacrilamida.