Validación del método colorimétrico de bifenilo para la determinación del contenido de carbohidratos en el polisacárido capsular de Streptococcus pneumoniae serotipo 5

Resumen

Streptococcus pneumoniae se encuentra entre los mayores patógenos causantes de infecciones invasoras y no invasoras en los dos extremos de la vida:  niños menores de 5 años y personas mayores de 65 años de edad. El Instituto Finlay de Vacunas inició el "Proyecto Neumococo", consistente en la concepción y desarrollo de la vacuna Quimi-Vio® (vacuna antineumocócica) cuya composición incluye 2 µg de polisacáridos de los serotipos 1, 5, 14, 18C, 19F, 23F y 4 μg del 6B conjugados con toxoide tetánico adsorbido sobre fosfato de aluminio. La validación de los métodos que permitan identificar y cuantificar los principios activos (polisacáridos capsulares en este caso) presentes en las formulaciones están dentro de los requisitos obligatorios para la liberación final del producto. Durante el proceso de control de calidad de estos polisacáridos, se evalúa el contenido o concentración de carbohidratos, que en el caso de los serotipos 1 y 5 se realiza mediante el método colorimétrico de bifenilo (m-hidroxibifenil). El presente trabajo tuvo como objetivo la validación del procedimiento analítico basado en el método de bifenilo para cuantificar carbohidratos en polisacáridos capsulares purificados de Streptococcus pneumoniae del serotipo 5, debido a la importancia de contar con un método de cuantificación de carbohidratos validado que permita ser aplicado en el control de calidad de estos ingredientes farmacéuticos activos. Se empleó una solución estándar de ácido galacturónico a 1 mg/mL preparada a partir de un Material de Referencia de Trabajo, ácido galacturónico lote AG (1)/18 para la preparación de la curva de calibración. Se realizó una evaluación de los parámetros de validación: linealidad, exactitud, precisión y especificidad, según exigencias actuales. El método de bifenilo fue específico, lineal, exacto y preciso en el rango de 0,005 - 0,10 mg/mL puesto que se cumplieron satisfactoriamente los criterios de aceptación establecidos para cada uno de ellos. El método colorimétrico de bifenilo o m-hidroxibifenilo resultó válido para el control de calidad de las muestras de polisacárido capsular purificado de Streptococcus pneumoniae evaluado, brindando resultados confiables.