Validación del método LAL para determinar endotoxinas bacterianas en el inyectable heparina sódica
Resumen
Dentro del control de la calidad de los productos farmacéuticos, la United State Pharmacopeia establece la cuantificación de endotoxinas bacterianas por el método de lisado de amebocito de Limulus , como monitor de pirógenos para más del 90% de los parenterales que regula. Este método se aplicó de forma específica a vacunas bacterianas y virales, agentes antineoplásicos, radiofármacos y parenterales que se producen en la industria médico farmacéutica. En el presente trabajo se mostró la metodología a seguir para realizar la validación de la técnica de determinación de endotoxinas bacterianas por el método de gelificación. Para ello se confirmó la sensibilidad del reactivo utilizado (0,03125 UE/mL) y la validez de los analistas para poder obtener resultados confiables. Las pruebas preliminares para el producto ensayado, heparina sódica 5000 UI/mL, demostraron que este producto no potencia ni inhibe la reacción del reactivo. Se escogió la dilución de trabajo (1/128) para la validación del método. De esta manera quedaron estandarizadas las condiciones para la validación del test de lisado de amebocito de Limulus por gelificación en este producto parenteral, método que se hace extensivo a la determinación de endotoxinas bacterianas en vacunas y en otros medicamentos por vía de administración intravenosa.Citas
The United States Pharmacopeia, 33th ed. USP33-NF28. Rockville: Mack Printing; 2010.
British Pharmacopoeia. Heparin Injection. Formulated Preparations: Specific Monographs. Volume 3. London, UK: British Pharmacopoeia; 2009.
Perdomo R. Ensayo del lisado de amebocitos del Limulus (LAL). Revista Cubana de Farmacia 2004;38(1):8-15.
Mascoli CC, Wery ME. Limulus amebocyte lysate (LAL) test for detecting pyrogens in parenteral injestable products and medical devices: Advantages to manufacturers and regulatory officials. J Parenteral Drugs Association 1979;33(2):81-95.
Lewn J, Bang FB. The role of endotoxin in the extracellular coagulation of limulus blood. Bull Johns Hopkins Hosp 1964;115(1):265-70.
Cooper JF. Principles and applications of the Limulus test for pyrogen in parenteral drugs. Bull Parenteral Drug Assc 1975;29(3):122-30.
Cooper JF, Hochtein HD, Seligmann EB. The Limilus test for endotoxin (Pyrogen) in radiopharmaceutical and biological. Bull Parenter Drug Assoc 1972;26(4):153-62.
United States Pharmacopeia 32th . The National Formulary 27th ed. Bacterial Endotoxins Test. Rockville, USA: USP-NF; 2009. p. 93.
CECMED. Buenas Prácticas para la Fabricación de Ingredientes Farmacéuticos Activos. Anexo No. 09. Resolución No. 03/06 y Regulación No. 16-2006. Directrices sobre Buenas Prácticas de Fabricación de Productos Farmacéuticos. Ãmbito regulador: La Habana: Órgano Oficial Regulatorio, Centro para el Control Estatal de la calidad de los medicamentos; 2006 nov; 6(Supl.Especial):1-16.
Todar K. Mechanisms of bacterial pathogenicity: endotoxins. In: Todar's Online Textbook of Bacteriology. Madison: University of Wisconsin, Department of Bacteriology; 2008. p. 8.
Iriarte MJ, Ugarte JC. Utilidad de la determinación de endotoxinas en diferentes ambientes laborales como indicador de riesgo por agentes biológicos. MAGFRE Medicina 2001;12(4):234-40.
Roth R, Tobia PS. Lipopolysaccharide-binding proteins of Limulus amebocyte yeast. Infection Immunity 1993, 61(3):1033-9. 13. Speer BR. Xiphosura: Horseshoe crabs. Routine testing and retest. Associates of Cape Cod Inc. LAL Update.1997; 15(2). Disponible en: http://www.ucmp.berkeley.edu/arthropoda/chelicerata/ xiphosura.html
Food and Drugs Administration (FDA). Guideline on validation of the limulus amebocyte lysate test as an end product endotoxin test for human and animal parenteral Drugs. Biological products and medical devices. Silver Spring, MD, USA: FDA; 1983.
Associates of Cape Cod Inc. Manual de Instrucción del Test LAL Pyrotell® . Vial de Ensayo Único. East Falmouth, MA, USA: ACC; 2011.
Baird R. Instructions for reconstitution, Control Standard endotoxin (CSE) Escherichia coli O11: H10. East Falmouth. MA, USA: ACC; Inc; 1988.
Associates of Cape Cod Inc. Routine testing and retest. LAL Update 1997;15(2):1-4.
Carrillo C, Ospina J, Aldana D, Arias J, Escheverri C. Validación de endotoxinas bacterianas en Ranitidina y Penicilina G sódica inyectables mediante la prueba de Lisado del amebocito de Limulus. Rev Universitas Scientiatum 2006;11(1):15-28.
Osorio O, Pérez X, Arias J, Rodríguez D, Fernández C. Interferencias en la validación del ensayo de Lisado de Amebocitos de Limulus para Oxitetraciclina 500 mg/mL. Rev Cubana Farmacia 2007;41(1):12-9.
Morote M, Otero M, Chávez G. Validación de la Técnica LAL (GEL CLOT) en los Agentes de Radiodiagnóstico y Radioisótopos. Alasbimn Journal 2002;4(16). Disponible en: http://www.alasbimnjournal.cl/revistas/16/secb/0,1990,SCID%253D1497,00.html
Dawson ME. Preliminary testing. LAL Update 1996;14(1):1-5.
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