Obtención de anticuerpos policlonales IgY antiparvovirus canino y evaluación en un sistema de aglutinación con látex
Palabras clave:
IgY, parvovirus canino, aglutinación en látex
Resumen
La parvovirosis canina es una de las principales infecciones que provoca gastroenteritis, fundamentalmente en cachorros, con altos índices de morbiletalidad. Los diagnosticadores más utilizados se basan en la detección de partículas virales excretadas durante la fase aguda de la enfermedad. Algunos requieren equipos especializados, lo que aumenta los costos y el tiempo de diagnóstico. Por esto, la simplificación de estos métodos con alta sensibilidad y especificidad es prioritaria. En Cuba solo se logra un diagnóstico presuntivo sin la completa confirmación de la enfermedad, principalmente por la escasez o ausencia de un medio diagnóstico en toda la red de consultorios y clínicas veterinarias, rápido, eficaz y ajustable a nuestras condiciones. Este trabajo tuvo como objetivo obtener anticuerpos policlonales IgY a partir de yema de huevo de gallina y evaluarlos mediante un sistema de látex-aglutinación, para su posible uso como terapia y principalmente en el diagnóstico. Se inmunizaron por vía intramuscular dos gallinas de raza Leghorn con una cepa atenuada de parvovirus canino (PVC) tipo 2. Se aplicaron 8 inoculaciones por ave cada 15 días. Se cosecharon los huevos y se purificaron los anticuerpos por el método de sulfato de dextrana/sulfato de sodio. Se determinó el título de IgY anti-PVC por el método de Inhibición de la Hemoaglutinación (IH) y con antígeno de PVC acoplado a partículas de látex de poliestireno. Por IH se obtuvo un título de IgY anti-PVC de 1:1024. Las mezclas de anticuerpos con títulos alto y medio de ambas gallinas aglutinaron con los reactivos preparados con 230 y 460 µg/mL de antígeno. La mayor intensidad de la reacción y la mejor detectabilidad correspondieron a los reactivos elaborados con los anticuerpos de mayor título.Citas
1. Crosby MJ, Diaz D, Reyes J. Alternativas de la inmunología como herramienta de investigación y diagnóstico: gen reacción, aislamiento y purificación de anticuerpos específicos en huevo de gallina. Diógenes 2004;1:137-49.
2. Pinto J, Barco M, Afanador MC, Merchán AM, Montañez MF, Andrade F, Torres O. Obtención de anticuerpos policlonales IgY antiparvovirus canino a partir de yema de huevo de gallina. Revista de la Facultad de Ciencias, Pontificia Universidad Javeriana 2005;10(1):37-44
3. Alarcón C, Hurtado H, Castellanos J. Anticuerpos aviares: alternativa en producción y diagnóstico. Biomédica 2000;4(20):338-43.
4. Larsson A, Bålöw RM, LIndahl T, Forsberg PO. Chicken antibodies: taking advantage of evolution-a review. Poultry Science 2003;72(10):1807-12.
5. Carmichael L. Recent advances in canine infectious diseases. New York: Ed. Ithaca; 2009.
6. Boffil P, Ramírez W, Montañez J, Reinaldo G, Pérez M, Percedo María, Aveledo María Antonia; Enfermedades Infecciosas de los Animales. Enfermedades producidas por virus. Tomo II. La Habana: Editorial Félix Varela; 2011. p.341-62.
7. Castillo J. Comportamiento epizootiológico de la parvovirosis canina en el período 2004"“2009 en el consejo popular Buenavista, Remedios, Cuba. REDVET 2012;13 (6). Disponible en: http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n060612B.htm
8. Ariza S, Fuentes D, Vera V, Villamil L, Ramírez G. Aglutinación en látex, ELISA y hemoaglutinación: Alternativas para el diagnóstico de la Parvovirosis canina en heces. Rev Med Vet Zoot. 2005;52:5-11.
9. Carmichael LE, Joubert JC, Pollok RV. Hemagglutination by Canine Parvovirus: Serologic Studies and Diagnostic Aplications. Am J Vet Res 1990;41(5):784-90.
10. Cazañas PJ. Agentes biológicos e inmunología veterinaria Tomo 2. La Habana: Ed Félix Varela; 2013.
11. Leenaars PP, Hendriksen CF, De Leeuw WA, Carat F, Delahaut P, Fisher R. The production of polyclonal antibodies in laboratory animals. The report and recommendation of ECVAM workshop 35. Altern Lab Anim; 2000;27:79-102.
12. Jensenius JC. 2001 Eggs: Conveniently package antibodies: method for purification of yolk IgG. J. Immunol Methods 2001;46:63-8.
13. Schade R, Gutiérrez E, Sarmiento R, Chacana PA, Porankiewicz-Asplund J, Terzolo H. 2005. Chicken egg yolk antibodies (IgY-technology): A review of progress in production and use in research and human and veterinary medicine. ATLA 2005;33:129-54.
14. Schade R, Behn I, Erhrad M. 2001. Chicken egg yolk antibodies, production and application: IgY-Technology .Springer Lab Manuals. Berlin: Springer-Verlag; Chapter 6.214-5
15. Leslie GA y Clem WL. Phylogeny of immunoglobulin structure and function: Immunoglobulins of the chicken. J.Exp Med. 1996;130:1337-52.
16. Statistical, Graphics Corporation 2013. Statgraphics Plus 6.1 for windows 7.professional. Ed.
17. Hechemy K, Michaelson E. Latex particle Assays in Laboratory Medicine. Part I. Lab. Management. 1984;22(6):27-40.
18. National Research Council. Guide for the care and use of laboratory animals. Washington, D.C.: Institute of Laboratory Animal Resourses; 2011.
19. Cedeño D, Lugo L, Muñoz J, Maldonado J. Guía para el uso de animales de experimentación. Santafé de Bogotá, D.C.: Instituto Nacional de Salud; 2004.
20. Gassman M, Thommmes P, Weiser T, Hubscher U. Efficient production of chicken egg yolk antibodies against a conserved mammalian protein. FASEB J. 2009;4: 2528-32.
21. Woolley JA, Landon J. Comparison of antibody production to human interleukin-6 (IL-6) by sheep and chickens. J. Immunol. Meth. 2011;178: 253-65.
22. Akita EM, Nakai S. Comparison of four purification methods for the production of immunoglobulins from eggs laid by hens immunized with an enterotoxigenic E. coli strain. J Immunol Methods. 1993;160: 207-14.
23. Jensenius JC, Andersen I, Hau J, Crone M, Koch C. Eggs: Conveniently packaged antibodies methods for purification of yolk IgG. J Immunol Methods. 2001;46: 63-8.
24. Bade H, Stegemann H. Rapid method of extraction of antibodies from hen egg yolk. J Immunol Methods. 1994;72:421-6.
25. Tini M, Jewel UR, Camnisch G, Chilov D, Gassmann M. Generation and application of chicken egg-yolk antibodies. Comp Biochem Physiol 2002;131(2):569-74.
26. Polsson A, Coetzer T, Kruger J, Maltzahn E, Merwe KJ. Improvement in the isolation of IgY from the yolks of egg laid by immunized hens. Immunol Invest 1995;14: 323-7.
27. Larson LR, Bradle JS. Inmunologic principles and inmunization strategy. Comp Cant Ed Pract Vet 2012;18:963-71.
28. Gómez E. Manual de Inmunología Veterinaria. Madrid: Prentice Hell; 2007.
29. Flores R. Parvovirosis canina y aspectos de inmunización. México DF: Laboratorios Litton de México; 2008.
2. Pinto J, Barco M, Afanador MC, Merchán AM, Montañez MF, Andrade F, Torres O. Obtención de anticuerpos policlonales IgY antiparvovirus canino a partir de yema de huevo de gallina. Revista de la Facultad de Ciencias, Pontificia Universidad Javeriana 2005;10(1):37-44
3. Alarcón C, Hurtado H, Castellanos J. Anticuerpos aviares: alternativa en producción y diagnóstico. Biomédica 2000;4(20):338-43.
4. Larsson A, Bålöw RM, LIndahl T, Forsberg PO. Chicken antibodies: taking advantage of evolution-a review. Poultry Science 2003;72(10):1807-12.
5. Carmichael L. Recent advances in canine infectious diseases. New York: Ed. Ithaca; 2009.
6. Boffil P, Ramírez W, Montañez J, Reinaldo G, Pérez M, Percedo María, Aveledo María Antonia; Enfermedades Infecciosas de los Animales. Enfermedades producidas por virus. Tomo II. La Habana: Editorial Félix Varela; 2011. p.341-62.
7. Castillo J. Comportamiento epizootiológico de la parvovirosis canina en el período 2004"“2009 en el consejo popular Buenavista, Remedios, Cuba. REDVET 2012;13 (6). Disponible en: http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n060612B.htm
8. Ariza S, Fuentes D, Vera V, Villamil L, Ramírez G. Aglutinación en látex, ELISA y hemoaglutinación: Alternativas para el diagnóstico de la Parvovirosis canina en heces. Rev Med Vet Zoot. 2005;52:5-11.
9. Carmichael LE, Joubert JC, Pollok RV. Hemagglutination by Canine Parvovirus: Serologic Studies and Diagnostic Aplications. Am J Vet Res 1990;41(5):784-90.
10. Cazañas PJ. Agentes biológicos e inmunología veterinaria Tomo 2. La Habana: Ed Félix Varela; 2013.
11. Leenaars PP, Hendriksen CF, De Leeuw WA, Carat F, Delahaut P, Fisher R. The production of polyclonal antibodies in laboratory animals. The report and recommendation of ECVAM workshop 35. Altern Lab Anim; 2000;27:79-102.
12. Jensenius JC. 2001 Eggs: Conveniently package antibodies: method for purification of yolk IgG. J. Immunol Methods 2001;46:63-8.
13. Schade R, Gutiérrez E, Sarmiento R, Chacana PA, Porankiewicz-Asplund J, Terzolo H. 2005. Chicken egg yolk antibodies (IgY-technology): A review of progress in production and use in research and human and veterinary medicine. ATLA 2005;33:129-54.
14. Schade R, Behn I, Erhrad M. 2001. Chicken egg yolk antibodies, production and application: IgY-Technology .Springer Lab Manuals. Berlin: Springer-Verlag; Chapter 6.214-5
15. Leslie GA y Clem WL. Phylogeny of immunoglobulin structure and function: Immunoglobulins of the chicken. J.Exp Med. 1996;130:1337-52.
16. Statistical, Graphics Corporation 2013. Statgraphics Plus 6.1 for windows 7.professional. Ed.
17. Hechemy K, Michaelson E. Latex particle Assays in Laboratory Medicine. Part I. Lab. Management. 1984;22(6):27-40.
18. National Research Council. Guide for the care and use of laboratory animals. Washington, D.C.: Institute of Laboratory Animal Resourses; 2011.
19. Cedeño D, Lugo L, Muñoz J, Maldonado J. Guía para el uso de animales de experimentación. Santafé de Bogotá, D.C.: Instituto Nacional de Salud; 2004.
20. Gassman M, Thommmes P, Weiser T, Hubscher U. Efficient production of chicken egg yolk antibodies against a conserved mammalian protein. FASEB J. 2009;4: 2528-32.
21. Woolley JA, Landon J. Comparison of antibody production to human interleukin-6 (IL-6) by sheep and chickens. J. Immunol. Meth. 2011;178: 253-65.
22. Akita EM, Nakai S. Comparison of four purification methods for the production of immunoglobulins from eggs laid by hens immunized with an enterotoxigenic E. coli strain. J Immunol Methods. 1993;160: 207-14.
23. Jensenius JC, Andersen I, Hau J, Crone M, Koch C. Eggs: Conveniently packaged antibodies methods for purification of yolk IgG. J Immunol Methods. 2001;46: 63-8.
24. Bade H, Stegemann H. Rapid method of extraction of antibodies from hen egg yolk. J Immunol Methods. 1994;72:421-6.
25. Tini M, Jewel UR, Camnisch G, Chilov D, Gassmann M. Generation and application of chicken egg-yolk antibodies. Comp Biochem Physiol 2002;131(2):569-74.
26. Polsson A, Coetzer T, Kruger J, Maltzahn E, Merwe KJ. Improvement in the isolation of IgY from the yolks of egg laid by immunized hens. Immunol Invest 1995;14: 323-7.
27. Larson LR, Bradle JS. Inmunologic principles and inmunization strategy. Comp Cant Ed Pract Vet 2012;18:963-71.
28. Gómez E. Manual de Inmunología Veterinaria. Madrid: Prentice Hell; 2007.
29. Flores R. Parvovirosis canina y aspectos de inmunización. México DF: Laboratorios Litton de México; 2008.
Publicado
2016-01-13
Cómo citar
González-Figueredo, J., Rajme-Manzur, D., Negrin-Thomson, G., & Dopico-Paz, J. (2016). Obtención de anticuerpos policlonales IgY antiparvovirus canino y evaluación en un sistema de aglutinación con látex. VacciMonitor, 24(3), 98-104. Recuperado a partir de https://vaccimonitor.finlay.edu.cu/index.php/vaccimonitor/article/view/55
Sección
Artículos Originales
Derechos de autor 2015 Jannet González-Figueredo, David Rajme-Manzur, Gilberto Negrin-Thomson, José Raúl Dopico-Paz
Esta obra está bajo licencia internacional Creative Commons Reconocimiento-NoComercial-CompartirIgual 4.0.
VacciMonitor es una revista de libre acceso, bajo licencia Creative Commons. La revista permite reutilizar su contenido acorde a: https:/creativecommons.org/licenses/by/4.0/deed.es.
Concede a los autores los permisos siguientes:
-Tener la propiedad total del copyright sin restricciones.
-Distribuir copias, electrónicas o impresas, del artículo publicado entre sus estudiantes o colegas, así como permiso para que los demás miembros de su institución las utilicen con propósitos de enseñanza.
-Reutilizar parte o la totalidad del artículo en nuevos manuscritos o libros futuros.
-VacciMonitor no pone reparos en que el autor coloque su versión, o la editada por la revista, en su sitio web personal o en un repositorio de acceso abierto.
-VacciMonitor autoriza a otras casas editoriales o bases de datos a reproducir los materiales originales publicados en ella, siempre que se indique su procedencia.
