Validación y aplicación de un ELISA para la cuantificación de anticuerpos IgG contra polisacárido capsular Vi de Salmonella Typhi
Resumen
Como parte de las etapas de investigación y desarrollo de un candidato vacunal conjugado contra Salmonella Typhi, se desarrolló un ELISA indirecto para la cuantificación de anticuerpos IgG contra el polisacárido Vi de esta bacteria. En este trabajo se presentan los resultados del proceso de validación, en el que se determinaron el intervalo y linealidad de la curva, la precisión intra e interensayo, la exactitud, la especificidad, el límite de detección y la robustez. La curva de calibración, generada con un suero estándar interno, presentó un buen ajuste a una función polinómica y un intervalo entre las diluciones 1/100 y 1/3200. Los coeficientes de variación en los ensayos de precisión y robustez y los porcentajes de recobrado estuvieron en los intervalos establecidos para cada uno (≤10%, ≤20% y 90-110% respectivamente). El ensayo presentó una especificidad óptima, obteniéndose señales de DO superiores a 1,3 para sueros positivos contra Vi y bajas para sueros contra antígenos no relacionados. Los resultados avalan el empleo de este ELISA cuantitativo en ensayos de inmunogenicidad para la liberación de lotes de conjugados de Vi. Igualmente, sustentan su uso para la evaluación de la inmunogenicidad de formulaciones de polisacárido Vi y conjugados de polisacárido Vi a proteínas en fases de investigación y desarrollo.Citas
WHO. Weekly epidemiological record Typhoid vaccines: WHO position paper. WHO 2008;6(83):49-60.
WHO. The immunological basis of immunization series. Módulo 20. Salmonella enterica serovar Typhi (typhoid) vaccines. Geneva: WHO Document Production Services; 2011.
Bhutta ZA, Capeding MR, Bavdekar A, Marchetti E, Ariff S, Soofi SB, et al. Immunogenicity and safety of the Vi-CRM197 conjugate vaccine against typhoid fever in adults, children, and infants in south and Southeast Asia: Results from two randomised, observer-blind, age de-escalation, phase 2 trials. Lancet Infect Dis 2014;14(2):119-29.
Rondini S, Micoli F, Lanzilao L, Hale C, Saul AJ, Martin L. Evaluation of the immunogenicity and biological activity of the Citrobacter freudii Vi-CRM197 conjugate as a vaccine for Salmonella enterica serovar Typhi. Clin Vaccine Immunol 2011;8(3):460-8.
Mandal S, Deb Mandal M, Pal NK. Changing Patterns of Antibiotic Resistances of Salmonella enterica Serovar Typhi in Kolkata, India. Advanced Bio Tech 2013;13(2):1-5.
Lu YJ, Zhang F, Sayeed S, Thompson CM, Szu S, Anderson PW, et al. A bivalent vaccine to protect against Streptococcus pneumoniae and Salmonella typhi. Vaccine 2012;30(23):3405-12.
Simon R, Levine M. Glycoconjugate vaccine strategies for protection against invasive Salmonella infection. Human Vaccine & Immunotherapeutics 2012;8(4):1-5.
World Health Organization (WHO). Guidelines on the quality, safety and efficacy of Typhoid conjugate vaccines. Geneva: WHO Press; 2013.
An SJ, Yoon YK, Kothari S, Kim DK, Kim JA, Kothari N, et al. Immune suppression induced by Vi capsular polysaccharide is overcome by Vi-DT conjugate vaccine. Vaccine 2012;30(6):1023-8.
Ali A, Jung AS, Cui C, Haque A, Carbis R. Preparation and evaluation of immunogenic conjugates of Salmonella enterica serovar Typhi O-specific polysaccharides with diphtheria toxoid. Human Vaccines & Immunotherapeutics 2012;8(2):189-93.
Plikaytis BD, Carlone GM. Program ELISA for Windows User's Manual, version 2. Centers for Desease Control and Prevention, Atlanta: CDC; 2005.
Ochoa RF. Técnicas inmunoenzimáticas en el desarrollo clínico de vacunas. La Habana: Finlay Ediciones; 2013.
Martínez JC, Ochoa RF, Estrada EA, Riverón L, González M, Ferriol XR, et al. Validación de un ELISA para la cuantificación de inmunoglobulinas séricas humanas anti polisacárido capsular de Salmonella typhi. VacciMonitor 1999;8(8):7-10.
Szu SC, Hunt H, Xie G, Robbins JB, Schneerson R, Gupta RK. A human IgG anti-Vi reference for Salmonella typhi with weight-based antibody units assigned. Vaccine 2013;31(15):1970-4.
Centro para el Control Estatal de la Calidad de los Medicamentos (CECMED). Anexo 1. De las Buenas Prácticas para Laboratorio de Control de Medicamentos. Validación de Métodos Analíticos. Regulación No. 37-2012. La Habana: CECMED; 2014.
Olivares MN, Ochoa R, Martínez JC, Licea T, Ferriol X, García AM, et al. Validación de un ELISA para la cuantificación de IgG humana anti-polisacárido capsular de Neisseria meningitidis serogrupo C. Biotecnología Aplicada 1999;16(2):113-5.
Leyva A, Sánchez JC, López L, Font M, González T, Pérez B, et al. Desarrollo, validación y aplicación de un nuevo ELISA para el control del proceso del antígeno de superficie del virus de la hepatitis B recombinante. Biotecnología Aplicada 2011;28(4):221-7.
Paul L, Steinke K, Meyer HH. Development and validation of a sensitive enzyme immunoassay for surveillance of Cry1Ab toxin in bovine blood plasma of cows fed Bt-maize (MON810). Analytica Chimica Acta 2008;607(1):106-13.
Mandiarote A, Gutiérrez N, Valmaseda T, Sosa R, Ontivero I, Talavera A. Estandarización de ensayos inmunoenzimáticos (ELISA) para la cuantificación de anticuerpos IgG inducidos por una vacuna de vesículas de membrana externa de los serogrupos A y W135 de Neisseria meningitidis. VacciMonitor 2012;21(2):16-23.
Cuello M, Acosta Y, Martínez JC, Cabrera O, Ochoa R, Balboa JA, et al. Validación de un ELISA para la cuantificación de IgG antipolisacárido capsular de Neisseria meningitidis serogrupo C en sueros de ratones. VacciMonitor 2001:10(4):7-13.
Derechos de autor 2015 Carlos Espinosa-Viñals, Yamilka Soroa-Millán, Yanet Martin-García, Amarilis Pérez-Baños, Milagros Nicot-Valenciano, Laura Rodríguez-Noda, Aylín Gómez-Amador, Ubel Ramírez-González, Jean Pierre Soubal-Mora, Dagmar García-Rivera
Esta obra está bajo licencia internacional Creative Commons Reconocimiento-NoComercial-CompartirIgual 4.0.
VacciMonitor es una revista de libre acceso, bajo licencia Creative Commons. La revista permite reutilizar su contenido acorde a: https:/creativecommons.org/licenses/by/4.0/deed.es.
Concede a los autores los permisos siguientes:
-Tener la propiedad total del copyright sin restricciones.
-Distribuir copias, electrónicas o impresas, del artículo publicado entre sus estudiantes o colegas, así como permiso para que los demás miembros de su institución las utilicen con propósitos de enseñanza.
-Reutilizar parte o la totalidad del artículo en nuevos manuscritos o libros futuros.
-VacciMonitor no pone reparos en que el autor coloque su versión, o la editada por la revista, en su sitio web personal o en un repositorio de acceso abierto.
-VacciMonitor autoriza a otras casas editoriales o bases de datos a reproducir los materiales originales publicados en ella, siempre que se indique su procedencia.
