Obtención de un diagnosticador rápido de cólera, basado en partículas de látex acopladas a un anticuerpo monoclonal contra lipopolisacárido de Vibrio cholerae O1

  • Maribel Cuello-Pérez Instituto Finlay
  • Oscar Otero-Alfaro Instituto Finlay
  • Fatima Reyes-López Instituto Finlay
  • Frank Camacho-Casanova Instituto Finlay
  • Giovanni Duranti CPM scientific
  • Marta María Morales-Leslie Centro Provincial de Higiene y Epidemiologia de La Habana
  • Regla Zenaida Mora-Guerra Centro Provincial de Higiene y Epidemiologia de La Habana
  • Sonsire Fernández-Castillo Instituto Finlay
  • Claudio Piermatte CPM scientific
  • Daniel Tomás Cardoso-González Instituto Finlay
  • Luis Guillermo García-Imia Instituto Finlay
  • Elizabeth González-Aznar Instituto Finlay
Palabras clave: anticuerpos monoclonales, Vibrio cholerae, diagnóstico, látex

Resumen

El cólera es una enfermedad infecto-contagiosa intestinal aguda, causada por la ingestión de alimentos o agua contaminada con los serotipos O1 y O139 de la bacteria Vibrio cholerae. Se caracteriza por diarrea secretora abundante que llevan rápidamente a la deshidratación. Sin tratamiento adecuado produce la muerte en horas, por lo que el diagnostico precoz es muy importante sobre todo porque al inicio es difícil diferenciarla de otras enfermedades diarreicas agudas. La prueba diagnóstico de oro es el coprocultivo; sin embargo, no garantiza una detección rápida de la enfermedad. Recientemente se desarrollaron ensayos rápidos, se basan en tiras reactivas y aglutinación con partículas de látex, muy efectivos, pero difíciles de adquirir por sus altos precios. El objetivo de este trabajo fue obtener un diagnosticador rápido basado en partículas de látex acopladas a un anticuerpo monoclonal (AcM) contra el lipopolisacárido de V. cholerae O1, el cual se obtuvo en el Instituto Finlay. Se usaron partículas de látex de 0,8 µm en una suspensión al 10% a las que se acopló durante 2 h a 37°C el AcM a 0,25 mg/mL. Se evaluó la sensibilidad, especificidad y el desempeño en 84 muestras de heces de pacientes con diagnóstico presuntivo de cólera. El diagnosticador que se obtuvo no evidenció reactividad cruzada frente a cepas no-O1, ni contra otros enteropatógenos. El diagnosticador látex presentó valores de sensibilidad, especificidad y eficacia de 97,87; 97,29 y 97,6 % respectivamente, muy similares al diagnosticador comercial CTK-Biotech. El diagnosticador látex que se obtuvo se puede utilizar en el diagnóstico rápido de la enfermedad.

Citas

Faruque SM, Albert MJ, Mekalanos JJ. Epidemiology, genetics, and ecology of toxigenic Vibrio cholera e. Microbiol Mol Biol Rev 1998;62:1301-14.

Ali M, López AL, You YA, Kim YE, Sah B, Maskery B, et al. The global burden of cholera. Bull World Health Organ 2012;90(3):209-18.

World Health Organization (WHO). Cholera, 2012, Monthly report on dracunculiasis cases, January-May 2013. Weekly Epidemiological Record 2013;88(31):321-36.

Global Health Observatory (GHO). Cholera. Geneva: WHO; 2013. Disponible en: http://www.who.int/gho/ epidemic_diseases/cholera/

Organización Panamericana de la Salud (OPS). Actualización Epidemiológica del cólera 20 de marzo 2014. Washington, DC: OPS; 2014. Disponible en: http://www.paho.org/hq/ index.php?option=com_docman&task=doc_view&gid=24600&Itemid

Global Health Observatory (GHO) . Number of reported cholera cases. Geneva: WHO; 2013. Disponible en: http://www.who.int/gho/epidemic_diseases/cholera

Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas ANLIS "CARLOS G. MALBRAN". III Curso Avanzado de Diagnóstico de Vibrio Cholerae y Salmonella. Buenos Aires: OMS; 2010.

Waldor MK, Mekalanos JJ. Lysogenic conversion by a filamentous phage encoding cholera toxin. Science 1996;272(5270):1910-4.

Farmer JJ, Kelly T. Enterobacteriaceae. In: Balows A, Hausler NJ, Herrmann KL, Isenberg HD, Shadomy HJ, eds. Manual of clinical microbiology. Washington, DC: ASM Press; 1991.p.360-83.

Holmgren J. Actions of cholera toxin and the prevention and treatment of cholera. Nature 1981;292(5822):413-7.

Centro para el Control y Prevención de las Enfermedades. Centro Nacional para las Enfermedades Infecciosas. Métodos de laboratorio para el diagnóstico de Vibrio cholerae . Atlanta: CDC; 1994.

Bolaños HM, Acuña MT, Serrano AM, Obando X, Mairena H, Cháves L, et al. Desempeño de los sistemas Cholera-SMART ® y Pathogen-Detection-Kit ® en el diagnóstico rápido del cólera. Rev Panam Salud Pública 2004;16(4):233-41.

Kelly MT, Hickman-Brenner FW, Farmer JJ. Vibrio. In: Balows A, Hausler NJ, Herrmann KL, Isenberg HD, Shadomy HJ, eds. Manual of clinical microbiology. Washington, DC: ASM Press; 1991.p.384-95.

Sinha A, SenGupta S, Ghosh S, Basu S, Sur D, Kanungo S, et al. Evaluation of a rapid dipstick test for identifying cholera cases during the outbreak Indian. J Med Res 2012;135(4):523-8.

Choo YY, Geik YA, Ang LC, Elina HT, Su YL, Falero G, et al. Dry-Reagent Gold Nanoparticle-Based Lateral Flow Biosensor for the Simultaneous Detection of Vibrio cholerae Serogroups O1 and O139. Journal of Microbiological Methods 2011;86(3):277-82.

Nato F, Boutonnier A, Rajerison M, Grosjean P, Dartevelle S, Guénolé A, et al. One-step immunochromatographic dipstick tests for rapid detection of Vibrio cholera O1 and O139 in stool samples. Clin Diagn Lab Immunol 2003;10(3):476-8.

Reyes F, Amín N, Otero O, Aguilar A, Cuello M, Valdés Y, et al. Four monoclonal antibodies against capsular polysaccharides of Neisseria meningitidis serogroups A, C, Y and W135: its application in identity tests. Biologicals 2013;41(4):275-8.

Falero G, Rodríguez BL, Rodríguez I, Campos J, Ledon T, Valle E, et al. Production and characterization of monoclonal antibodies to E1 Tor toxin co-regulated pilus of Vibrio cholerae Hybrid. Hybridomics 2003;22(5):315-20.

Ochoa RF. Técnicas inmunoenzimáticas en el desarrollo clínico de vacunas. La Habana: Finlay Ediciones; 2013.p.25-41.

Publicado
2015-12-03
Cómo citar
Cuello-Pérez, M., Otero-Alfaro, O., Reyes-López, F., Camacho-Casanova, F., Duranti, G., Morales-Leslie, M., Mora-Guerra, R., Fernández-Castillo, S., Piermatte, C., Cardoso-González, D., García-Imia, L., & González-Aznar, E. (2015). Obtención de un diagnosticador rápido de cólera, basado en partículas de látex acopladas a un anticuerpo monoclonal contra lipopolisacárido de Vibrio cholerae O1. VacciMonitor, 24(1), 10-20. Recuperado a partir de https://vaccimonitor.finlay.edu.cu/index.php/vaccimonitor/article/view/12
Sección
Artículos Originales