Determinación de residuos de deoxicolato de sodio en formulaciones vacunales por cromatografía electrocinética micelar

  • Yaima Merchán Instituto Finlay
  • Silvia Lucangioli Facultad de Farmacia y Bioquímica, Universidad de Buenos Aires
  • Clyde Carducci Facultad de Farmacia y Bioquímica, Universidad de Buenos Aires
  • Esther María Fajardo Instituto Finlay
  • Jeannete Rico Instituto de Nacional Oncología y Radiobiología
  • Yolexis Tamayo Instituto Finlay
  • Ileana Delgado Instituto Finlay
Palabras clave: deoxicolato de sodio, MEKC, vesículas de membrana externa

Resumen

El deoxicolato de sodio (DCNa) es el surfactante por excelencia empleado en la industria biofarmacéutica para la solubilización de vesículas de membrana externa. Es bien conocida la importancia que reviste el control de este metabolito en materiales biológicos, debido a su alta toxicidad para el organismo humano. Para demostrar la presencia de bajas concentraciones de este metabolito en formulaciones vacunales es necesario el empleo de una metodología altamente selectiva, sensible, específica y reproducible. En el presente reporte se utilizó la cromatografía electrocinética micelar (MEKC) en un analizador capilar de iones (Water corp. Milford MA), con una detección a 185 nm, con lámpara de mercurio. Se empleó un capilar de sílica fundida (Waters Corp. Milford MA); se evaluó la pureza de dos lotes de deoxicolato de sodio y se analizaron 15 muestras de vesículas purificadas, ingrediente farmacéutico activo de formulaciones vacunales. Los datos fueron registrados y procesados con el software Millennium TM (Waters Corp. Milford MA). Se determinó que los lotes de deoxicolato de sodio contenían 1,19% y 0,44% de ácido cólico contaminante y que el 93% de las muestras de vesículas purificadas tenían de 0 a 2,44 µg DCNa/100 µg de proteína. Los resultados obtenidos por MEKC fueron comparados con una modificación de una prueba cinética empleada para determinar ácidos biliares en sangre (Merckotest). El sistema MEKC mostró mejores resultados con respecto al Merkotest.

Citas

Rodríguez Cabrera M, González Fernández P, Bayolo Guanche PJ, Barrera Padrón Z. Caracterización preliminar del desoxicolato de sodio de los proveedores Merck y Fluka.Revista CENIC Ciencias Químicas 2005;36(4). Disponible en: http://revista.cnic.edu.cu/revista/files/CQ-2005-4-CQ-022.pdf

Rotunda RM, Suzuki H, Moy RL, Kolodney MS. Detergent effects of sodium deoxycholate are a major feature of an injectable phosphatidylcholine formulation used for localized fat dissolution. Derm Surg 2004;30(7):1001-8.

Rotunda AM and Kolodney MS. Lipomas treated with subcutaneous deoxycholate injections.J Amer Acad Derm 2005; 53:973-8.

García-canas V, Cifuentes A. Detection of microbial food contaminants and their producís by capillary electromigration techniques. Electrophoresis 2007;28:4013-30.

Martínez-Gómez MA, Carril-Aviles MM, Sagrado S, Villanueva-Camanas RM, Medina-Hernández MJ. Characterization of antihistamine-human serum protein interactions by capillary electrophoresis.J Chromatogr A 2007;1147(2):261-9.

Magaña JJ, de la Luz Arenas-Sordo M, Gómez R. La electroforesis capilar como una nueva estrategia en la medicina y el diagnóstico clínico.Rev Méd Chile 2009;137:946-56.

Liu X, Dahdouh F, Salgado M, Gómez FA. Recent advances in affinity capillary electrophoresis (2007).J Pharm Sci 2009;98: 394-410.

Wallingford RA, Ewing AG. Capillary electrophoresis.Adv Chromatogr 1989;(29):1-76.

Lamari FN, Gioldassi XM, Mitropoulou TN, Karamanos NK. Structure analyisi of lipoglycans and lipoglycan-derived carbohydrates by capillary electrophoresis and mass spectrometry.Biomed Chromatogr 2002;16:116-26.

LiJ Thibault P, Martín A, Richard JC, Wakarchuuk WW, Van del Wilp W. Development of an on line preconcentration method for the analysis of pathogenic lipopolysaccharides using capillary electrophpresis-electrossprespay mass spectrometry. Application to small colony isolates.J Chormatogr A 1998;817:325-36.

Rodríguez V, Lucangioli S, Fernández Otero G, Carducci C. Determination od bile acids in pharmaceutical formulations using micellar electrokinetic chromatography. Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis 2000;23:375-81.

Lucangioli S, Rodríguez V, Fernández G, Carducci C. Determination of related impuretties of bile acids in bula drugs by ciclodextrin-modified micellar electrokinetic chromatography. Journal of capillary electrophoresis. Shelton: ISC Technical Publication; 1997.

López-Avila V, van de Goor T, Bohuslav G, Coufal P. Separation of haloacetic acids in water by capillary zone electrophoresis with drect UV detection and contactless conductivity detection. J Chromatogr A 2003;993:143-152.

Ackermans MT, Everaerts FM, Beckers JL. Quantitative analysis in capillary zone electrophoresis with conductivity and indirect UV detection. J Chromatogr A 1991;549:345-55.

Rudolph WG, Planella J, Bernal A, Correa J, Salazar J. Variaciones diurnas de los ácidos biliares totales sanguíneos en el equino: efectos del ayuno. Av Cs Vet 1998;13(1):16-20.

Mac Faddin. Biochemical test for identification of medical bacteria. 2 ed. Baltimore: Williams and Wilkins;1980.

Rudd DR. Suitability of Analytical methods for stability testing. Is the room for Improvement? Journal of Validation Technology 2001;5(3):255-61.

Publicado
2016-03-15
Cómo citar
Merchán, Y., Lucangioli, S., Carducci, C., Fajardo, E., Rico, J., Tamayo, Y., & Delgado, I. (2016). Determinación de residuos de deoxicolato de sodio en formulaciones vacunales por cromatografía electrocinética micelar. VacciMonitor, 20(3), 27-33. Recuperado a partir de https://vaccimonitor.finlay.edu.cu/index.php/vaccimonitor/article/view/106
Sección
Artículos Originales